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免疫组织化学(IHC)实验样本制备步骤详解

发布时间:2024-03-20 16:27分享:
免疫组织化学(Immunohistochemistry,IHC)是利用抗原与抗体特异性结合的原理,通过化学反应使标记抗体的显色剂(荧光素、酶、金属离子、同位素)显色来确定组织细胞内抗原(多肽和蛋白质)。

固定


1. 组织取材后,要立即放入固定液中进行固定,以防止组织自溶与腐败。

2. 常用的固定液有10%的甲醛(福尔马林)、酒精、醋酸酒精等。

3. 本实验采用10%的中性福尔马林固定液,将组织块放入其中进行固定。

4. 固定液的量应为组织体积的5~10倍,固定时间一般在18~24h,以使组织充分固定。


包埋


1. 脱水后的组织需要进行包埋,以使其能够耐受切片过程中的机械作用力。

2. 常用的包埋剂有石蜡、树脂等。本实验采用石蜡作为包埋剂。

3. 将脱水后的组织取出,放入熔化的石蜡中进行包埋。



脱蜡


1.将载玻片上的切片置于脱蜡剂中,以去除蜡块并使切片恢复水合状态。

2.脱蜡过程通常涉及将载玻片在不同浓度的酒精中逐渐脱蜡,然后在水中进行最后的水合。



组织包埋机

       主要用于动植物标本经脱水浸蜡后进行组织蜡块包埋,以供切片后作组织学诊断或研究。本产品由主机+冷台+热台三部分组成,具有5个温控系统,其中蜡缸、蜡嘴、工作台、保存缸和储镊块温度控制在室温-99℃范围内任意可调,冷台温度可控,容积6L,一次可满足400个组织同时包埋。


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