多因子检测样本的收集和处理

正确的样本收集整理方法，是实验成功至关重要的步骤。目前可以检测样本类型有: 细胞上清、血清、血浆。尽管其他生物学样本没有经过验证，但是理论上也可以检测，这些样本包括: BAL，唾液，CSF，组织匀浆液和尿液。

下面我们针对几种常见样本的收集、保存方法：

1、血清

全血室温（20-25 °C）凝固20-30min；

室温1,000 x g 10min；

收集上清，或者选择使用血清分离器；

可选：如果样本是高血脂样本，请先在2-8℃10,000 x g 离心 10min，分离出下层血清；

多因子检测血清样本要求新鲜；如果不能在24h内检测，需要分装在-80 ℃保存，避免反复冻融。

2、血浆

根据要求选择柠檬酸或EDTA作为抗凝剂。如果选择肝素作为抗凝剂，建议每毫升血不超过10IU肝素（肝素用量过高，可能会导致部分检测指标值偏高）。

收集抗凝全血后30min内，在4℃下10,000 x g离心10min，分离收集血浆；

可选：如果样本是高血脂样本，请先在2-8℃10,000 x g 离心 10min，分离出下层血浆；

多因子检测血浆样本要求新鲜；如果不能在24h内检测，需要分装在-80 ℃保存，避免反复冻融。

3、细胞培养上清

检测分泌性的成份时，最好用无菌管收集。离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清。

4、组织样本

如果可以，请按照参考文献推荐的方法。标本取完后液氮迅速冷冻保存备用。标本融化后仍然保持2-8℃的温度。加入一定量的含有蛋白酶抑制剂的缓冲液, 用手工或匀浆器将标本匀浆化。离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清。

保存过程中如果有沉淀，检测前样本应该再次离心去除沉淀，建议16,000 x g 离心5min。